Polimorfismos en los genes de desintoxicación CYP1A1, CYP2E1, GSTT1 y GSTM1 en la susceptibilidad al cáncer gástrico Auxiliadora González1*, Vanessa Ramírez1, 3, Patricia Cuenca 1, 2 & Rafaela Sierra 1, 3 1 Instituto de Investigaciones en Salud (INISA). Universidad de Costa Rica, 2060, San José, Costa Rica. 2 Escuela de Biología. Universidad de Costa Rica, 2060, San José, Costa Rica. 3 Escuela de Nutrición. Universidad de Costa Rica, 2060, San José, Costa Rica. * Fax: (506) 207 5130; auxigv@costarricense.cr Abstract: Polymorphisms in detoxification genes CYP1A1, CYP2E1, GSTT1 and GSTM1 in gastric can- cer susceptibility. Cytochrome P450 (CYP) and glutathione S-transferase (GST) enzymes are involved in acti- vation and detoxification of many potential carcinogens. Genetic polymorphisms in those enzymes have been found to influence the interindividual susceptibility to cancer. Some polymorphisms of those enzymes have been associated specifically with susceptibility to gastric cancer. We conducted a study in a Costa Rican population, where gastric cancer incidence and mortality rates are among the highest in the world. We investigated whether such variations affected the risk of developing gastric cancer. Subjects included 31 with gastric cancer, 58 con- trols with gastric injures others than cancer and 51 normal controls confirmed by X-rays (double-contrast) or endoscopic diagnostic. DNA from peripheral white blood cell was obtained from all subjects. Deletion of GSTT1 and GSTM1 was assessed by multiplex PCR and genotyping of CYP2E1 was performed using a PCR- based restriction fragment length polymorphism assay with the restriction enzyme PstI and the gene CYP1A1 using the restriction enzyme MspI. The prevalence of CYP1A1 MspI polymorphism, GSTT1 and GSTM1 null genotype was similar in the three groups of individuals (p=0.73, p=0.88 y p= 0.89 respectively). Our findings suggest that the polymorphism CYP2E1 PstI could be associated with a reduced risk of having gastric cancer (OR=0.09, IC95%:0.01 - 0.83). Rev. Biol. Trop. 52(3): 591-600. Epub 2004 Dic 15. Key words: gastric cancer, genetic susceptibility, molecular epidemiology, cytochrome P450 (CYP), glutathione S-transferase, (GST). Palabras clave: cáncer gástrico, susceptibilidad genética, epidemiología molecular, citocromo P450 (CYP), glu- tation S-transferasa, (GST). El cáncer gástrico es la segunda causa de muerte por cáncer en el mundo (Parkin y Pisa- ni 1999). Es responsable de casi un millón de nuevos casos anualmente (Ferlay et al. 2001). Costa Rica es uno de los países con mayores ta- sas de incidencia y mortalidad por este cáncer (Sierra et al. 1995, Ferlay et al. 2001). Los tipos más frecuentes de cáncer gástri- co son el tipo intestinal y el tipo difuso. Ambos difieren en su etiología, epidemiología y meca- nismos biológicos. El tipo intestinal presenta una mayor incidencia, es más frecuente en hombres que en mujeres y se ha relacionado con factores ambientales, mientras que el difu- so, es menos frecuente, afecta por igual a indi- viduos de ambos sexos y está relacionado con factores genéticos (Shibata et al. 2001). El desarrollo del cáncer gástrico de tipo intestinal, es un proceso con varios estadios entre los cuales intervienen múltiples factores de riesgo genéticos y ambientales que facilitan, retrasan o evitan su aparición. Los cambios que preceden a este tipo de cáncer son la gas- tritis crónica atrófica, la metaplasia y la displasia (Correa 1992). Algunos de los facto- res ambientales asociados con el incremento Recibido 06-IX-2003. Corregido 31-II-2004. Aceptado 09-II-2004. Rev. Biol. Trop. 52 (3): 591-600, 2004 www.ucr.ac.cr www.ots.ac.cr www.ots.duke.edu REVISTA DE BIOLOGÍA TROPICAL592 del riesgo a desarrollar este tipo de cáncer son el bajo nivel socioeconómico, la producción endógena de nitrosaminas, la infección por He- licobacter pylori, la ingesta de productos con alto contenido de sal o productos nitrosados e irritantes, el bajo consumo de frutas y verduras y la historia familiar de cáncer gástrico (Anó- nimo 1997, Sierra 2002). Cada individuo tiene un grado diferente de susceptibilidad de llegar a desarrollar cáncer gástrico. Estas diferencias pueden ser producto de ciertos polimorfismos genéticos. Algunos de los polimorfismos que han sido estudiados como factores de riesgo de cáncer gástrico son los polimorfismos del gen de la interleucina 1-β (El-Omar et al. 2000) o de genes involu- crados en el metabolismo de sustancias cance- rígenas, entre otros (Hengstler et al. 1998, Nis- himoto et al. 2000, Cai et al. 2001, Saadat y Saadat 2001). Actualmente las principales enzimas co- nocidas involucradas en el metabolismo de sustancias cancerígenas pertenecen a las fami- lias citrocromo P450 y Glutatión S-transferasa. Estas participan en la activación y desintoxica- ción de sustancias que podrían actuar como factores de riesgo o de protección de cáncer gástrico. Las sustancias cancerígenas pueden provenir de los alimentos, drogas u otro tipo de sustancias químicas que ingresan al cuerpo o de sustancias endógenas (Lang y Pelkonen 1999). Los individuos que cargan la forma más activa de una enzima relacionada con la activa- ción de los carcinógenos, o los alelos menos eficientes de las enzimas de desintoxicación, podrían presentar un mayor riesgo de desarro- llar cáncer (Krajinovic et al. 1999). En la presente investigación se estudió la asociación entre las lesiones gástricas leves (ti- po I y II) y el cáncer gástrico, con los polimor- fismos de desintoxicación química CYP1A1 MspI y CYP2E1 Pst I, de mayor expresión en- zimática y los polimorfismos de los genes GSTM1 y GSTT1 que carecen de un producto proteínico funcional, en una población costarri- cense de alto riesgo para cáncer gástrico. MATERIALES Y MÉTODOS Población de estudio: La muestra del presente estudio fue seleccionada a partir de la población que participó en una investigación más amplia sobre: Marcadores biológicos en sangre para la identificación de personas con alto riesgo de cáncer gástrico, que se llevó a cabo con personas que acudían al Centro de Detección Temprana de Cáncer Gástrico del Hospital Max Peralta y con pacientes del Hos- pital Calderón Guardia. Se seleccionaron 140 individuos con eda- des entre los 18 y 93 años y se clasificaron en tres grupos. Un primer grupo está formado por 51 personas sin sospecha de cáncer gástrico (grupo control), según el examen por rayos X (serie gastroduodenal de doble contraste) que se llevó a cabo con equipos de alta resolución siguiendo el método Japonés del Centro de Detección Temprana de Cáncer Gástrico o sin cáncer gástrico según el diagnóstico endoscó- pico de ambos hospitales. Un segundo grupo conformado por 58 pacientes con lesiones gás- tricas leves. El tercer grupo corresponde a 31 individuos diagnosticados con cáncer gástrico por patólogos especialistas. Análisis de laboratorio: Las pruebas de laboratorio se llevaron a cabo en el Instituto de Investigaciones en Salud de la Universidad de Costa Rica. La extracción de ADN de las muestras se realizó utilizando el método con- vencional de extracción con fenol-cloroformo adaptado por González (2003). Para la amplificación de los genes GSTT1 y GSTM1 se siguió el método utilizado por Lum y Le Marchand (1998) con las modifica- ciones de González (2003). Los iniciadores utilizados para el gen GSTT1 fueron 5’- TTCCTTACTGGTCCTCACACTCT-3’ y 5’- TCACCGGATCATGGCCAGCA-3’, y para el gen GSTM1 los iniciadores 5’-GAAC- TCCCTGAAAAGCTAAAGC-3’ y 5’-GTT- GGGGTCAAATATACGGTGG-3’. Se coamplificó un fragmento del gen de β- globina de 268 pares de bases como control INTERNATIONAL JOURNAL OF TROPICAL BIOLOGY AND CONSERVATION 593 interno, cuyos iniciadores son 5’-CAACTT- CATCCACGTTCACC-3’ y 5’-GAAGAGC- CAAGGACAGGTAC-3’. Los fragmentos para los genes GSTT1 y GSTM1 corresponden a bandas de 720 pares de bases y 215 pares de bases respectivamente. En los casos donde el producto de la reacción es el polimorfismo mutado que carece de ex- presión enzimática (GSTT1*0 o GSTM1*0), no se observa la banda correspondiente. Para el análisis del polimorfismo CY- P1A1, alelo MspI, se siguió el protocolo utili- zado por Lum y Le Marchand (1998) con las modificaciones de González (2003). Los ini- ciadores utilizados fueron 5’-TAGGAGT- CTTGTCTCATGCCT-3’ y 5-’CAGTGAA- GAGGTGTAGCCGCT-3’. Del producto obte- nido a partir de la PCR se tomaron 10 µl para la reacción de digestión con 10U de la enzima de restricción MspI. El ADN del alelo mutante CYP1A1 MspI produjo bandas de 200 y 140 pa- res de bases y el alelo del gen CYP1A1 que no produjo corte por la enzima de restricción, co- rresponde a un fragmento de 340 pares de bases. Finalmente para el análisis del polimorfis- mo genético CYP2E1 PstI se siguió el método utilizado por Anwar et al. (1996), con algunas variaciones utilizadas por González (2003). Los iniciadores utilizados para amplificar este gen fueron el 5’-CCAGTCGAGTCTACAT- TGTCA-3’ y 5’-TTCATTCTGTCTTCTAA- CTGG-3’. Posteriormente 10 µl del producto de la PCR fueron digeridos durante toda la no- che a 37ºC con 10 U de la enzima de restric- ción PstI. La presencia de un sitio de corte pa- ra la enzima corresponde al alelo mutante (CYP2E1 PstI), en el cual se observan dos fragmentos, uno de 120 pares de bases y otro de 290 pares de bases; mientras que el alelo CYP2E1 sin sitio de corte, presenta un único fragmento de 410 pares de bases. Análisis estadístico: Los análisis estadís- ticos de los datos se llevaron a cabo utilizando el programa STATA 6.0 (Stata Corp. 1999. Sta- tistics/ Data Analysis. Texas, USA). Para estimar diferencias entre las frecuen- cias de los genotipos entre los tres grupos de es- tudio se utilizó la prueba de χ2. La relación entre el cáncer gástrico y cada uno de los facto- res de riesgo se midió utilizando la razón de riesgo (odds ratios = OR) y sus intervalos de confianza (IC) al 95%, derivados de un análisis de regresión logística ordinal (Lindsey 1997). RESULTADOS La distribución según sexo y edad se puede observar en el cuadro 1. El promedio de la edad de los individuos con cáncer gástrico (60.71 años), es mayor que el promedio de edad de los individuos de los otros grupos. Del total de 140 individuos, 86 eran hombres y 54 mujeres. En el grupo de individuos con cáncer, se presentó un mayor número de hombres con la patología que de mujeres (25 y 6 respectivamente). El cuadro 2 muestra la distribución de las frecuencias genotípicas, para los genes GSTM1, GSTT1, CYP1A1 y CYP2E1 en la población de estudio. No se encontraron dife- rencias estadísticamente significativas en las frecuencias genotípicas para ninguno de los genes, entre los tres grupos de estudio (GSTM1 p=0.89, GSTT1 p=0.88, CYP1A1 p=0.73, CYP2E1 p=0.18). No se encontró evidencia significativa de interacción entre el polimorfismo CYP1A1 MspI y el riesgo de cáncer de estómago o lesio- nes gástricas. Del mismo modo, tampoco se encontró evidencia de asociación para los dife- rentes genotipos de los genes GSTs (GSTT1 y GSTM1). Sin embargo, los individuos con un genotipo homocigoto del polimorfismo CY- P2E1 PstI presentaron menor frecuencia de cáncer gástrico. Este alelo podría actuar como factor de protección contra el cáncer gástrico (OR=0.09 ajustados por edad y sexo, IC95%: 0.01 - 0.83) (cuadro 3). DISCUSIÓN Los homocigotos para alelo GSTM1*0, presentaron una frecuencia de 51.43% del total de la población en estudio. En términos gene- rales se estima que las frecuencias varían entre REVISTA DE BIOLOGÍA TROPICAL594 CUADRO 1 Distribución por sexo y edad de la población de estudio (N=140) TABLE 1 Distribution by sex and age (N=140) Variable Sanos n (%) Lesiones n (%) Cáncer n (%) Total Edad <48 años 15 (29.51) 16 (27.59) 3 (9.68) 34 (24.29) 48-58 años 15 (29.41) 14 (24.14) 8 (25.81) 37 (26.43) 59-66 años 12 (23.00) 12 (20.69) 11 (35.48) 35 (25.00) >66 años 9 (17.65) 16 (27.59) 9 (29.03) 34 (24.29) Promedio de edad 51.73 ± 16.54 55.69 ± 15.34 60.71 ± 10.67 Ámbito de edad 18-76 23-93 32- 78 Sexo* Femenino 18 (35.29) 30 (51.72) 6 (19.35) 54 (38.57) Masculino 33 (64.72) 28 (48.28) 25 (80.65)** 86 (61.43) * p= 0.01 para los sexos entre los grupos: sanos, lesiones y cáncer. ** p=0.0006 dentro del grupo de individuos con cáncer por sexo. CUADRO 2 Frecuencias genotípicas de los genes GSTM1, GSTT1, CYP1A1 y CYP2E1 en cada uno de los grupos de estudio TABLE 2 GSTM1, GSTT1, CYP1A1 and CYP2E1 genotypic frequency by group Genotipo Grupo Número de individuos (%) Casos (%) Grupo con lesión (%) Controles (%) GSTM1 31 58 51 GSTM1*0/GSTM1*0 15(48.39) 31(53.45) 26(50.98) 72 (51.43) GSTM1/GSTM1 y GSTM1/GSTM1*0 16 (51.61) 27(46.55) 25(49.02) 68 (48.57) p 0.89 GSTT1 31 58 51 GSTT1*0/GSTT1*0 6(19.35) 11(18.97) 8(15.69) 25 (17.86) GSTT1/GSTT1 y GSTT1*0/GSTT1 25(80.65) 47(81.03) 43(84.31) 115 (82.14) p 0.88 CYP1A1 31 58 51 CYP1A1/ CYP1A1 10(32.26) 25(43.10) 22(43.14) 57 (40.71) CYP1A1/ CYP1A1 Msp1 19(61.29) 27(46.55) 25(49.02) 71 (50.71) CYP1A1 MspI /CYP1A1 Msp1 2(6.45) 6(10.34) 4(7.84) 12 (8.57) p 0.73 CYP2E1 31 58 51 CYP2E1/ CYP2E1 20(65.52) 39(67.24) 31(60.78) 90 (64.29) CYP2E1/ CYP2E1 PstI 11(35.48) 18(31.03) 15(29.41) 44 (31.43) CYP2E1 PstI/ CYP2E1 PstI 0(0.00) 1(1.72) 5(9.80) 6 (4.29) p 0.18 p: probabilidad obtenida por χ2. INTERNATIONAL JOURNAL OF TROPICAL BIOLOGY AND CONSERVATION 595 un 30 a 70%, en diferentes poblaciones (El- Zein et al. 1997, Setiawan et al. 2000). Los individuos con el genotipo homocigo- ta para el alelo nulo del gen GSTM1, no pre- sentaron diferencia en el riesgo de padecer de cáncer gástrico o lesiones precancerosas con respecto a los individuos que poseían el alelo normal. Este mismo resultado se encontró en otros estudios (Deakin et al. 1996, Kato et al. 1997, Setiawan et al. 2000, Lan et al. 2001, Wu et al. 2002). Sin embargo, otras investiga- ciones han obtenido una asociación positiva entre el riesgo de cáncer gástrico y la presencia de este alelo. Cai et al. (2001) observaron un exceso de homocigotos para el alelo GSTM1*0 en los pacientes con cáncer gástrico (OR=2.63 IC95%: 1.17-5.88), y a la vez, en los individuos fumadores portadores de este geno- tipo un riesgo mucho mayor (OR=8.06 IC95%: 2.83-23.67). Saadat y Saadat (2001) reportaron un incremento en el riesgo de cáncer gástrico de 2.3 veces en los pacientes homocigotas pa- ra dicho genotipo. Otros investigadores como Harada et al. (1992) también encontraron un mayor riesgo en los portadores de este genoti- po. Katoh et al. (1996) encontraron una débil asociación entre los individuos con el polimor- fismo nulo y el riesgo de cáncer gástrico. Los homocigotos para el alelo GSTT1*0, representaron el 17.86% de la población de es- tudio. Otros investigadores han reportado la frecuencia de este genotipo entre el 10% y has- ta el 65% de los individuos en varias poblacio- nes (Setiawan et al. 2000). El alelo nulo para el gen GSTT1, del mismo modo que el alelo nu- lo para el gen GSTM1, tampoco mostró aso- ciación con el riesgo de desarrollo del cáncer gástrico. Otros investigadores obtuvieron un resultado similar (Deakin et al. 1996, Katoh et al. 1996, Cai et al. 2001, Saadat y Saadat 2001, Wu et al. 2002). Sin embargo, Setiawan et al. (2000) y Lan et al. (2001) difieren con estos resultados, ya que encontraron un riesgo mayor de cáncer gástrico en individuos ho- mocigotas para el genotipo nulo (OR=1.48 IC95%: 0.97-2.25 y OR=2.5 IC95%: 1.01-6.22 respectivamente). Las proteínas de la superfamilia GST es- tán involucradas en la desintoxicación de una amplia variedad de compuestos potencial- mente cancerígenos (Lan et al. 2001). Aún no está claro cuales de las sustancias que meta- bolizan estas proteínas están relacionadas con un incremento en el riesgo del cáncer de estó- mago. Por esta razón, son necesarios más es- tudios que confirmen la asociación de los ge- notipos nulos del gen GSTT1 y el riesgo de cáncer de estómago con el fin de elucidar el papel de este polimorfismo en la patogénesis de este mal. Para el gen CYP1A1, 8.57 % de indivi- duos presentaron el genotipo homocigota del alelo MspI y 50.71% fueron heterocigotas para dicho alelo. Este valor es un poco mayor a los observados en otras etnias, en las cuales la fre- cuencia reportada de los homocigotos para el alelo MspI varía entre 0.5 a 5% (D’Errico et al. 1999). No se encontró ninguna asociación CUADRO 3 Asociación entre el polimorfismo CYP2E1 PstI y el riesgo de cáncer gástrico TABLE 3 Association between CYP2E1 PstI polymorphism and gastric cancer risk Genotipo Casos Grupo con Controles Odds ratio* Intervalo de confianza p lesión normales (95%) (95%) CYP2E1/CYP2E1 20 39 31 1 CYP2E1 PstI/CYP2E1 11 18 15 0.95 0.53 - 2.10 0.88 CYP2E1 PstI/CYP2E1PstI 0 1 5 0.09 0.01 - 0.83 0.03 * ajustados por edad y sexo REVISTA DE BIOLOGÍA TROPICAL596 entre el cáncer gástrico y los diferentes genoti- pos del gen CYP1A1. Este polimorfismo ha si- do poco estudiado como factor de riesgo del cáncer gástrico y en ninguna investigación hasta la fecha se ha encontrado algún tipo de asociación. En dos estudios no se encontró di- ferencias en la distribución de las frecuencias de los genotipos MspI o Ile/Val entre los pa- cientes con cáncer de estómago y los controles (Kawajiri et al. 1993, Oda et al. 2000). Tatemi- chi et al. (1999), reportaron la expresión de CYP1A1 y CYP1A2 en muestras de metapla- sia intestinal y concluyeron que al parecer su expresión en la mucosa gástrica es alta en las células cancerosas, por lo cual la proteína po- dría contribuir en la transformación de sustan- cias en mutágenos, aumentando la susceptibili- dad del individuo. Por ello, este polimorfismo es interesante y debe ser estudiado más a fondo en su relación con este tipo de cáncer. Este po- limorfismo podría estar involucrado en el desa- rrollo más rápido del tumor, transformando una mayor cantidad de sustancias en carcinogénos. La frecuencia de los homocigotos con el polimorfismo PstI del gen CYP2E1 fue baja. Se observó una frecuencia de homocigotos de 4.29% y de los heterocigotas de 31.43%. Este resultado es similar al de otras poblaciones en las cuales la frecuencia de los homocigotos pa- ra este polimorfismo varía entre un 2 a un 8% (Kato et al. 1996, El-Zein et al. 1997 y Nishi- moto et al. 2000). Sin embargo, las frecuencias en asiáticos son mucho mayores (alrededor de 47% de los casos y 48% de los controles en un estudio caso-control) (Nishimoto et al. 2000). Este estudio sugiere un efecto protector contra el cáncer gástrico conferido por el geno- tipo homocigoto para el polimorfismo CY- P2E1 PstI. Otros investigadores han reportado resultados similares, tal es el caso de Nishimo- to et al. (2000), quienes encontraron un riesgo menor asociado al polimorfismo RsaI (posible- mente la misma mutación que PstI) en una po- blación de brasileños no japoneses y en una población de brasileños de origen japonés. Oda et al. (2000) y Marchant et al. (1999), también encontraron asociación entre este alelo y una disminución en el riesgo de este tipo de cáncer. Si esto es confirmado quedaría abierta la posi- bilidad de que otras variables enzimáticas de este tipo, pudieran modular el riesgo del desa- rrollo del cáncer gástrico (González et al. 2002). Otras investigaciones han obtenido resul- tados diferentes. Gao et al. (2002), Kato et al. 1995, Kato et al. 1996, Kato et a.l 1997), no encontraron ningún tipo de asociación entre este polimorfismo y el riesgo de cáncer gástri- co. Aunque, Gao et al. (2002) encontraron que los individuos homocigotas y heterocigotas con este polimorfismo presentan un incremen- to en el riesgo cuando fuman y consumen altas cantidades de carne. Wu et al. (2002), encon- traron una asociación positiva significativa en- tre las personas homocigotas para el alelo PstI con un riesgo 2.9 veces mayor de padecer cán- cer gástrico (IC95%: 1.4-6.4). Ellos sugieren que este hallazgo es compatible con el hecho de que esta proteína cataliza la oxidación de varias sustancias, especialmente de procarci- nógenos de bajo peso molecular como las ni- trosaminas, a carcinógenos capaces de formar aductos en el ADN (Wu et al. 2002). Es evidente que para lograr una interpreta- ción más adecuada de este tipo de estudios fal- ta una mayor investigación ya que el cáncer es multifactorial. Se deben conocer más las inte- racciones genes-ambiente, incluyendo la dieta y el fumado, ya que los factores ambientales alteran la actividad enzimática y modifican la susceptibilidad del riesgo al cáncer (Gao et al. 2002). De hecho, en diferentes investigaciones se han reportado diferencias en la actividad de la enzima CYP2E1 por etnia y género. Se esti- ma que existe una actividad enzimática menor en un 25% para las mujeres y que la actividad en los japoneses es entre 30 a 40 % menor que en los caucásicos (O’Shea et al. 1994, Kim et al. 1995, Kim et al. 1996). La disminución en el riesgo del desarrollo del cáncer gástrico en los pacientes con el ale- lo PstI o RsaI observado en ésta y otras inves- tigaciones, podría deberse a que este polimor- fismo presenta una mayor actividad transcrip- cional y a que participa en el metabolismo de los compuestos N-nitrosos. Según Hayashi et al. INTERNATIONAL JOURNAL OF TROPICAL BIOLOGY AND CONSERVATION 597 (1991), el incremento en la expresión de este polimorfismo en los homocigotos es diez ve- ces mayor. Sin embargo, se desconoce con exactitud el mecanismo a través del cual este polimorfismo podría reducir el riesgo (Mar- chant et al. 1999, Gao et al. 2002). La enzima de CYP2E1 metaboliza una gran cantidad de sustancias de diferentes estructuras molecula- res, lo cual podría indicar que no presenta una afinidad alta por el sustrato, por lo que en cier- tos casos se necesitaría gran cantidad de sus- trato para que se realice la desintoxicación (Guengerich et al.1991, citado por Lang y Pel- konen 1999). De este modo, es posible que el genotipo CYP2E1 Pst1, represente protección contra el cáncer gástrico por poseer una mayor actividad transcripcional y por lo tanto una mayor capacidad para desintoxicar sustancias. La regulación de la enzima CYP2E1 es compleja e involucra eventos tanto a nivel transcripcional como a nivel postranscripcio- nal, lo que hace difícil demostrar su asociación con el cáncer (Eliasson et al. 1992). Es impor- tante aclarar que una variable alélica para un gen del metabolismo de los xenobióticos, po- dría causar efectos dañinos en una población con exposición alta a un determinado carcinó- geno ambiental. No obstante, en la ausencia de los carcinógenos, un individuo portador del alelo de alto riesgo podría no presentar ningún efecto en el riesgo de cáncer gástrico (Gonzá- lez et al. 2002). Es importante tener en cuenta que los rangos de edades de los individuos seleccio- nados para este estudio es amplio. Existe la posibilidad de que algunas de las personas más jóvenes que no presentan cáncer gástrico llegaran a desarrollarlo en el futuro ya que la edad es un importante factor de riesgo de cán- cer gástrico tipo intestinal. Casi todos los estudios, al igual que esta investigación, se basan en pruebas de genoti- pos asociados a la enfermedad, sin embargo el fenotipo de las enzimas de desintoxicación química es un fenómeno muy complejo, en el cual múltiples y desconocidos factores entran en juego. Tanto factores endógenos como exó- genos podrían inducir o inhibir la actividad enzimática (estado hormonal, estrés oxidativo, edad y enfermedades que haya padecido el in- dividuo, interacciones droga-droga, hábitos alimenticios). Por esta razón debe estudiarse más profundamente la relación entre el genoti- po-fenotipo, en el caso de estos genes con el fin de interpretar de una mejor manera los re- sultados obtenidos en este tipo de estudios (Vi- neis y Malats 1999). Como muestran los resultados de esta in- vestigación, no se encontró ningún tipo de aso- ciación estadísticamente significativa entre los genotipos nulos de los genes GSTT1 y GSTM1 ni con el polimorfismo CYP1A1 MspI con el riesgo de desarrollar cáncer gástrico; pe- ro si se encontró una asociación significativa entre la presencia del polimorfismo CYP2E1 Pst1 y una disminución del riesgo de padecer cáncer gástrico. Con una mayor investigación y junto a los resultados obtenidos en otras in- vestigaciones, en un futuro se tendrá mayor claridad respecto a la susceptibilidad propor- cionada por estos genes como factores de ries- go de cáncer gástrico. AGRADECIMIENTOS Un sincero agradecimiento al personal del INISA, al CONICIT, a Jorge Lobo por el apo- yo estadístico y al Sistema de Estudios de Pos- grado en Biología de la Universidad de Costa Rica. Esta investigación fue financiada por la Vicerrectoría de Investigación de la Universi- dad de Costa Rica (proyecto N.742-AO-025). RESUMEN Las enzimas de las familias P450 y Glutation S- transferasa están relacionadas en la activación y desintoxi- cación de sustancias que podrían actuar como canceríge- nas. Polimorfismos genéticos en estas enzimas han sido asociados con un incremento en el riesgo de desarrollar cáncer específicamente con un mayor riesgo de desarrollar cáncer gástrico. En esta investigación se estudió un grupo de costarricenses con alto riesgo de cáncer gástrico. Se es- tudiaron 31 individuos con cáncer gástrico, 51 controles normales confirmados por rayos X (serie gastroduenal de REVISTA DE BIOLOGÍA TROPICAL598 doble contraste) o por endoscopía y 58 individuos con otras lesiones gástricas. Se estudiaron los polimorfismos de desintoxicación química CYP1A1 MspI y CYP2E1 Ps- tI, los cuales presentan una mayor expresión enzimática y los polimorfismos de los genes GSTT1 y GSTM1 que ca- recen de un producto proteínico funcional y su relación con lesiones gástricas leves y cáncer gástrico. El ADN de los pacientes fue aislado a partir de leucocitos de sangre periférica. Los polimorfismos de los genes GSTT1 y GSTM1 fueron evaluados mediante un PCR múltiple y pa- ra los polimorfismos CYP2E1 PstI y CYP1A1 MspI se realizó un PCR seguido por la digestión con las enzimas de restricción PstI y MspI respectivamente. La prevalencia del polimorfismo CYP1A1 MspI, y de los polimorfismos GSTT1 y GSTM1 sin actividad enzimática, fue similar en los tres grupos estudiados (p=0.73, p=0.88 y p= 0.89 res- pectivamente). Los resultados sugieren que el alelo CY- P2E1 Pst1 podría actuar como factor protector contra el cáncer gástrico (OR=0.09, IC al 95%: 0.01-0.83). REFERENCIAS Anónimo. 1997. Stomach. Food, Nutrition and the preven- tion of cancer: a global perspective. World Cancer Research. American Institute for Cancer Research. pp. 148-175. Anwar, W., S. Abdel-Rahman, R. El-Zein, H. Mostafa & W. Au. 1996. Genetic polymorphism of GSTM1, CYP2E1 and CYP2D6 in Egyptian bladder cancer patients. Carcinogenesis 17: 1923-1929. Cai, L., S. Yu & Z. Zhang. 2001. Gluathione S-transferases M1, T1 genotypes and the risk of gastric cancer: A ca- se-control study. World J. Gastroenterol. 7: 506-509. Correa, P. 1992. Human gastric carcinogenesis: A multis- tep and multifactorial process. Cancer Res. 52: 6735- 66740. 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