Identificación morfológica y molecular de las especies del género Brevipalpus spp. (Acari: Tenuipalpidae) en cítricos, y evaluación de la presencia e identificación del virus de la leprosis de los cítricos (cilv) asociado

Abstract

El género Brevipalpus presenta variabilidad interespecífica desde su descripción. Por eso surge la interrogante de cuáles especies se encuentran en Costa Rica asociadas a cítricos. Las técnicas moleculares y morfológicas son herramientas complementarias que permiten una identificación más precisa a nivel de especie, lo cual es de importancia, ya que algunas especies del género Brevipalpus han sido asociadas a la trasmisión de virus, tales como los virus de la leprosis de los cítricos, los del tipo citoplasmático CiLV-C y citoplasmático tipo 2 CiLV-C2, y los nucleares como el virus de la leprosis de los cítricos nuclear (CiLV-N) y el orchid fleck virus-citrus (OFV-citrus). Por esta razón, la evaluación de la presencia de estos virus brinda información en el manejo que se puede realizar en las plantaciones citrícolas. En esta investigación se muestrearon 16 fincas con naranja (Citrus sinensis L.), distribuidas en la Región Central, Región Huetar Norte, y Región Brunca. Se identificó mediante caracteres morfológicos a las especies Brevipalpus yothersi, B. azores, B. papayensis y se propone una especie nueva de dicho género (Brevipalpus sp. nov.), la cual se encuentra en proceso de descripción. La secuenciación parcial del gen COX 1, permitió identificar a las especies B. yothersi, B. azores, y Brevipalpus sp. nov. Brevipalpus yothersi se encontró en la Región Central y Brunca, mientras que B. azores, B. papayensis y Brevipalpus sp. nov., fueron encontradas únicamente en la Región Brunca. La reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa inversa fue utilizada para evaluar la presencia de los virus de la leprosis de los cítricos (CiLV-C, CiLV-C2, CiLV-N y OFV- citrus) utilizando material vegetal asintomático o con síntomas de clorosis. En cada uno de los análisis, sólo se obtuvo amplificación del control positivo (ADN brindado por el laboratorio de Fitopatógenos Obligados y sus Vectores). De este modo se determinó que las fincas muestreadas eran negativas para dichos virus.

The genus Brevipalpus presents interspecific variability since its description. Therefore, the question arises as to which species are found in Costa Rica associated with citrus. Molecular and morphological techniques are complementary tools that allow a more precise identification at the species level, which is important, since some species of the genus Brevipalpus have been associated with virus transmission, such as citrus leprosy viruses, cytoplasmic type CiLV-C and cytoplasmic type 2 CiLV-C2, and nuclear viruses such as citrus leprosy virus-nuclear (CiLV-N) and orchid fleck virus-citrus (OFV-citrus). For this reason, the evaluation of the presence of these viruses provides information on the management that can be carried out in citrus plantations. In this research, 16 orange (Citrus sinensis L.) farms were sampled, distributed in the Central Region, Northern Huetar Region, and Brunca Region. The species Brevipalpus yothersi, B. azores, B. papayensis were identified by morphological characters and a new species of this genus (Brevipalpus sp. nov.) was proposed, which is in process of description. Partial sequencing of the COX 1 gene identified the species B. yothersi, B. azores, and Brevipalpus sp. nov. Brevipalpus yothersi was found in the Central and Brunca Regions, while B. azores, B. papayensis and Brevipalpus sp. nov. were found only in the Brunca Region. Reverse transcriptase polymerase chain reaction was used to evaluate the presence of citrus leprosy viruses (CiLV-C, CiLV-C2, CiLV-N and OFV- citrus) using asymptomatic plant material or with symptoms of chlorosis. In each of the analyses, amplification was obtained only from the positive control (DNA provided by the laboratory of Obligate Phytopathogens and their Vectors). Thus, it was determined that the sampled groves were negative for these viruses.