Estudio de los factores angiogénicos ANGPT1, ANGPT2, TNF-α, VEGFA y miR-203a en la carcinogénesis gástrica inducida por la infección de Helicobacter pylori in vitro e in vivo

Abstract

El adenocarcinoma gástrico es el quinto tipo de cáncer más común y el cuarto en mortalidad a nivel mundial. El factor de riesgo más importante es la infección crónica con la bacteria Helicobacter pylori, que coloniza el estómago e induce una respuesta inflamatoria que puede desembocar en varias patologías gástricas incluido el cáncer. La infección puede alterar la vasculatura gástrica mediante la desregulación de factores angiogénicos y microARNs. Sin embargo, los mecanismos por los que la bacteria induce una neovascularización temprana en la mucosa gástrica y cómo influye esto sobre los eventos precancerosos que preceden el cáncer, no está completamente comprendido. En esta tesis se presentan tres distintos estudios que fueron realizados para investigar la expresión de varios factores proangiogénicos y proinflamatorios como VEGFA, TNF-A, ANGPT1, ANGPT2, TEK, y microRNAs miR-203a, miR-200a y miR-135. Para eso, se usaron líneas celulares de cáncer gástrico (AGS, MKN28 y MKN45) co-cultivadas con H. pylori, un modelo murino y se realizó el genotificado de SNPs de genes proinflamatorios (TNF-A, IL-6, IL-8 e IFNGR1) en ADN de muestras de sangre humana. Los resultados sugieren que H. pylori podría contribuir al proceso de carcinogénesis por la desregulación de miR-203a, que a su vez promueve la angiogénesis en la mucosa gástrica al incrementar la expresión de ANGPT2 en el modelo in vitro. En el epitelio gástrico murino, la bacteria indujo la expresión de Angpt2, TNF-A y Vegf-A. Además se encontró una asociación entre el polimorfismo TNF-A-857*T y el riesgo de padecer cáncer gástrico en Costa Rica. Este polimorfismo produce una mayor expresión del gen TNF-A, cuya proteína TNF-α, es un activador del endotelio y encargado de la secreción de ANGPT2.Gastric adenocarcinoma is the fifth most common type of cancer worldwide, and the fourth cause of death by cancer in both sexes. The most important risk factor worldwide is chronic infection with Helicobacter pylori, which colonizes the stomach and induces an inflammatory response that can lead to several gastric pathologies, including cancer. The infection can alter the gastric vasculature by the deregulation of angiogenic factors and microRNAs. However, the molecules and mechanisms by which the bacterium induces early neovascularization in gastric mucosa, and how this influences the precancerous series of events that precede GC is not completely understood. Three distinct studies were performed in order investigate the expression several proangiogenic and inflammatory factors as VEGFA, TNF-A, ANGPT1, ANGPT2, TEK, and microRNAs miR-203a, miR-200a, and miR-135, using gastric cancer cell lines (AGS, MKN28, MKN45) co-cultured with H. pylori, a mouse model and the genotyping of SNP in proinflammatory genes (TNF-A, IL-6, IL-8 and IFNGR1) in DNA from human blood samples. The results suggest that H. pylori could contribute to the process of carcinogenesis by downregulating miR-203a, which further promotes angiogenesis in gastric mucosa by increasing ANGPT2 expression in the in vitro model. In the murine gastric epithelium, the bacterium induced the expression of Angpt2, Tnf-A and Vegf-A. An association was found between TNF-A-857*T SNP and the risk developing of gastric cancer in Costa Rica. That polymorphism produces a higher expression of TNF-A gene, which protein TNF-α, is an activator of the endothelium and related with the secretion of ANGPT2.